一、 實驗原理
二、應用簡介
腺病毒(Adenovirus)是一種沒有包膜的直徑為70~90 nm的病毒顆粒,為線狀雙鏈DNA分子,約含35000 bp,兩端各有長約100 bp的反向重復序列。
實驗平臺的腺病毒為5型血清型腺病毒,缺失了腺病毒的早期表達基因序列E1區和E3區。E1是腺病毒復制所必須的,E1的缺失使其不能自身復制,只能依靠包裝細胞如HEK293細胞提供的反式互補進行復制擴增,以此保證腺病毒的安全性。E3基因表達的蛋白能對抗宿主的抗病毒防御系統,E3區的去除能減少宿主的體內免疫反應。
腺病毒包裝采用的是最新的AdMax系統,通過Cre-loxp重組酶,使共轉染到HEK293細胞中的腺病毒載體穿梭質粒和骨架質粒(腺病毒基因組質粒)在重組酶的作用下產生重組腺病毒,獲得的病毒滴度更高,其病毒滴度可以達到1×10^12pfu/ml 。
腺病毒載體有CMV、mCMV、CAG、PGK、UbC、EF1a、等多種啟動子可供選擇;而且還有EGFP、ZsGreen、tdTomato、mCherry、EYFP等多種熒光標記蛋白可供選擇。
三、實驗方法
四、樣本送檢要求
五、案例展示
過表達腺病毒感染原代大鼠神經元細胞圖片
六、常見問題
七、服務流程
病理學檢測
分子生物學檢測
免疫學檢測服務
細胞實驗服務
動物實驗平臺