免疫熒光(IF),是應用抗原與抗體特異性結合的原理,通過熒光標記抗體對組織細胞內抗原進行定位、定性及定量的研究。
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。
目前主要可以對石蠟切片、冰凍切片、細胞爬片、組織芯片進行免疫熒光檢測。
免疫熒光技術可用于:(1)研究特異蛋白抗原在細胞內分布;(2)對抗原進行細胞定位;(3)對特定抗原進行定量檢測
五、案例展示
六、常見問題
1、無/弱染色
烤片溫度過高,推薦56℃-60℃1-2h;
一抗是否適用固定液和石蠟切片,使用濃度是否過低,孵育是否時間過短等。
2、非特異性背景染色
是否滅活內源性過氧化物酶;
孵育過程中干片;
抗原熱修復過度。
3、染色過深
一抗濃度過高;
染色試濃度過高或孵育時間過長;
染色劑濃度過高或孵育時間過長。
七、服務流程
病理學檢測
分子生物學檢測
免疫學檢測服務
細胞實驗服務
動物實驗平臺